Der Klempner Mario (Originalstimme: Chris Pratt) und sein Bruder Luigi (Charlie Day) haben den Auftrag, eine unterirdische Pipeline zu reparieren. Dabei landen sie aber – durch eine der aus den Spielen bekannten grünen Röhren – unbeabsichtigt im Pilz-Königreich der Martial-Arts-technisch erstaunlich kompetenten Prinzessin Peach (Anya-Taylor Joy). Aber die bunte Pilz-Welt sieht sich mit einer großen Gefahr konfrontiert: Der fiese Schildkröten-König Bowser (Jack Black) will seine Macht ausweiten und das Königreich zerstören. Als er von Luigi getrennt wird, muss Mario mit Hilfe des etwas tollpatschigen Pilzes Toad also nicht nur Bowser zurückschlagen, sondern im selben Moment auch noch seinen verschwundenen Bruder wiederfinden.

Nach dem „Super Mario Bros.“-Realfilm von 1993 bringt nun Illumination Entertainment, das Studio hinter „Die Minions“ und „Pets“, den ersten animierten Film über den ikonischsten aller Nintendo-Helden in die Kinos: