Fünf Jahre sind vergangen, seitdem Gaylord „Greg“ Focker (Ben Stiller) das Aufeinandertreffen seiner Eltern und der Familie seiner Frau Pam (Teri Polo) mit Mühe und Not und ohne bleibende Schäden für Seele und Körper überstanden hat. Mittlerweile ist er stolzer Vater von Zwillingen, was die kleine Focker-Familie vor ganz ungeahnte neue Herausforderungen stellt. Schwiegerpapa und Ex-CIA-Agent Jack Byrnes (Academy Award Gewinner Robert De Niro) hat natürlich völlig andere Vorstellungen von Erziehung als Greg. Für noch mehr Verwirrrung sorgt Pams Ex, Kevin (Owen Wilson), der unvermittelt wieder auf der Bildfläche erscheint. Dazu kommen noch die Avancen einer schönen Unbekannten (Jessica Alba), die den gestressten Papa zusätzlich verunsichern. Die größte Hürde steht Greg jedoch noch bevor: Hat er das Zeug dazu, der nächste „Ober-Focker“ zu werden oder wird der Kreis des Vertrauens für immer zerstört?